蜂农为防治幼虫病，可能违规使用四环素、土霉素等抗生素，导致其残留于蜂蜜中，引发耐药性风险。作为食品检验员，必须对出口或高端蜂蜜实施监控。依据《GB/T 18932.22-2002》，推荐使用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）。

检测流程：

1. 提取：

• 称取5 g蜂蜜，加McIlvaine缓冲液（pH 4.0）溶解。

• 加EDTA掩蔽金属离子，防止四环素络合沉淀。

2. 净化：

• 经Oasis HLB固相萃取柱富集。

3. LC-MS/MS分析：

• 色谱柱：C18柱（含极性封端）

• 流动相：甲醇-0.1%甲酸+0.5 mM EDTA水溶液

• 质谱：ESI+模式，MRM扫描

• 四环素特征离子：m/z 445→410；土霉素：m/z 461→426

• 内标法（¹³C-四环素）定量

限量要求（欧盟及我国出口标准）：

• 四环素类总量：≤ 10 μg/kg（部分国家要求 ≤ 5 μg/kg）

食品检验员注意事项：

• EDTA必须加入流动相，防止峰拖尾。

• 蜂蜜高糖基质易堵塞色谱柱，需充分净化。

• 若检出阳性，应追溯蜂场用药记录。

• 推荐养蜂户采用益生菌替代抗生素。

抗生素残留虽微量，但长期摄入加剧全球耐药危机。食品检验员通过痕量检测，推动蜂业绿色转型。