孔雀石绿是一种禁用渔药，具有强致癌性和致畸性，曾被用于防治鱼体水霉病。尽管我国明令禁止，仍有不法养殖户违规使用。其代谢物隐色孔雀石绿（Leucomalachite Green, LMG）在鱼体中残留时间更长，是主要监控对象。作为食品检验员，必须采用高灵敏方法检测。依据《GB/T 20361-2006》，推荐使用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）。

检测流程：

1. 提取：

• 称取5 g鱼肉，加乙腈和乙酸乙酯混合液，超声提取。

• 加入对甲苯磺酸还原孔雀石绿为LMG。

2. 净化：

• 用MCX阳离子交换固相萃取柱富集。

3. 浓缩定容：氮吹浓缩，甲醇复溶。

4. LC-MS/MS分析：

• 色谱柱：C18柱

• 流动相：乙腈-5 mM乙酸铵水溶液

• 质谱：ESI+模式，MRM扫描

• LMG特征离子：m/z 329→314

• 内标法（D5-LMG）定量

限量标准（农业农村部公告 第250号）：

• 孔雀石绿及其代谢物：不得检出（检测限 ≤ 0.5 μg/kg）

食品检验员注意事项：

• 全程避光操作，防止光降解。

• 还原步骤必须彻底，否则低估总残留。

• 若初筛ELISA阳性，必须用LC-MS/MS确证。

• 重点抽检鳜鱼、鲈鱼、黄颡鱼等高风险品种。

孔雀石绿无安全阈值。食品检验员通过痕量检测，震慑违法行为，推动水产养殖绿色转型。