农产品食品检验中的菌落总数（也称为总活菌数）检测是评估食品卫生质量的重要指标之一。它反映了食品中细菌的污染程度，对于判断食品的新鲜度、保存条件以及潜在的健康风险具有重要意义。以下是常用的菌落总数检验方法及其步骤：

平板计数法（Plate Count Method）

平板计数法是一种经典的微生物学技术，用于估计样品中的活菌数量。这种方法简单易行，并且适用于大多数类型的食品。

所需材料与设备

稀释液：通常使用无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液。

培养基：营养琼脂（Nutrient Agar）、胰蛋白胨大豆琼脂（TSA, Tryptic Soy Agar）或其他适合目标微生物生长的固体培养基。

实验器材：无菌移液管、无菌试管、无菌培养皿、均质器或搅拌棒等。

恒温培养箱：能够维持在适宜温度下（通常是36±1℃）。

其他：酒精灯、接种环等常规实验室器具。

操作步骤

样品制备

取适量代表性样品（根据标准要求，一般为25g），加入到含有225ml稀释液的无菌均质袋中。

使用均质器将样品充分混匀，制成1:10的初始稀释液。

系列稀释

从上述稀释液中取出1ml，加入到含有9ml稀释液的新无菌试管中，制成1:100稀释度；重复此过程以获得所需的更高稀释倍数（如1:1000, 1:10000等）。

接种与培养

选择合适的稀释度（通常选择三个连续稀释度），每个稀释度取0.1ml均匀涂布于预先准备好的固体培养基表面。

将涂布后的培养皿倒置放入预热至36±1℃的恒温培养箱中，培养24至48小时（具体时间取决于所使用的培养基和待测样品类型）。

计数菌落

培养结束后，在明亮背景下用肉眼观察培养皿上的菌落形成单位（CFU）。理想的计数范围应在30-300 CFU之间；如果超出此范围，则需要调整稀释倍数重新测试。

计算每个稀释度下的平均菌落数量，按照公式计算原始样品中的菌落总数：

菌落总数（CFU/g或CFU/mL）=（平均菌落数×稀释倍数）/接种体积菌落总数（CFU/g或CFU/mL）=（平均菌落数×稀释倍数）/接种体积

注意事项

无菌操作：整个过程必须严格遵守无菌技术，避免外界微生物污染影响结果准确性。

培养条件控制：确保培养温度和时间符合标准要求，不同类型的微生物可能需要不同的培养条件。

记录详细信息：包括样品来源、处理方式、稀释度、培养条件等，以便后续分析和追踪。

通过上述方法，食品检验员可以有效地测定农产品中的菌落总数，从而评估其卫生状况并采取相应的措施来保障食品安全。此外，随着技术的进步，现在也有一些自动化仪器可用于快速检测菌落总数，这些方法可以在较短时间内提供结果，提高了工作效率。然而，传统的平板计数法仍然是最基础也是最可靠的方法之一。