食品检验员哥特里-罗紫法
哥特里-罗紫法(也称为Rose-Gottlieb法)是一种用于测定乳制品中脂肪含量的经典方法,尤其适用于含有较高糖分或干物质的乳制品,如奶油、冰淇淋和奶酪等。该方法利用乙醚和石油醚从酸化的样品中提取脂肪,并通过蒸发溶剂后称重的方式来确定脂肪含量。以下是食品检验员使用哥特里-罗紫法进行乳制品脂肪含量测定的具体步骤及注意事项。
哥特里-罗紫法的基本原理
该方法基于溶剂萃取技术,通过向样品中添加氨水和乙醇使蛋白质溶解,然后用乙醚和石油醚提取脂肪成分。经过过滤和蒸发去除溶剂后,剩余的物质即为脂肪,可以通过称重来计算其含量。
所需材料和设备
分析天平:精确到0.0001克。
索氏提取器或脂肪瓶:用于提取过程中的样品处理。
干燥器:用于冷却称量瓶。
恒温水浴锅:维持反应温度。
真空泵或旋转蒸发仪:用于去除溶剂。
试剂:
氨水(浓氨水)
95%乙醇
乙醚(无水)
石油醚(沸程30-60°C)
操作步骤
准备样品:
准确称取适量的乳制品样品(通常为2-5克),置于预先干燥并恒重的脂肪瓶中。
预处理样品:
向样品中加入10毫升氨水,充分混合均匀。
在水浴中加热至约65°C,持续搅拌15分钟,确保蛋白质完全溶解。
添加乙醇并冷却:
加入10毫升95%乙醇,继续搅拌混合。
将溶液冷却至室温。
萃取脂肪:
先加入25毫升乙醚,再加入25毫升石油醚,盖紧瓶塞,剧烈振摇1分钟,使脂肪充分溶解于溶剂中。
静置一段时间,让两相分离。
过滤与洗涤:
使用滤纸过滤上层有机相,收集滤液。
用少量新鲜溶剂冲洗脂肪瓶和滤纸上的残留物,合并滤液。
蒸发溶剂:
将滤液转移至已知重量的蒸发皿中,在通风橱内自然挥发大部分溶剂。
使用旋转蒸发仪或在水浴上温和加热除去剩余溶剂。
干燥与称重:
将蒸发皿放入100-105°C的烘箱中干燥至恒重,取出放入干燥器中冷却后称重,记录质量。
计算结果:
根据蒸发皿前后重量差计算出脂肪的质量,进而得出样品中脂肪的百分比含量。
注意事项
安全措施:乙醚和石油醚是易燃且具有一定毒性的溶剂,操作时应在通风良好的环境中进行,并远离火源。
精确度:所有使用的器具都应事先清洗干净并干燥,确保没有残留物影响实验结果。
温度控制:严格控制加热温度,避免过高温度导致脂肪分解。
重复性检查:对同一样品进行多次测试,以验证结果的一致性和准确性。
校准仪器:定期校准分析天平等关键设备,保证其正常工作。
哥特里-罗紫法虽然较为耗时,但由于其较高的准确性和适用范围广,在乳制品行业特别是对于复杂基质的乳制品脂肪含量测定中仍具有重要价值。这种方法能够提供可靠的脂肪含量数据,有助于产品质量控制和营养价值评估。