食品检验员粮油及制品中淀粉的测定
测定粮油及制品中的淀粉含量是评估其营养价值和质量的重要步骤。淀粉是一种重要的碳水化合物,广泛存在于谷物、豆类和根茎类植物中。食品检验员通常使用酶水解法或酸水解法来测定淀粉含量。以下是一些常见的测定方法及其具体操作步骤。
一、酶水解法(推荐方法)
酶水解法利用特定的酶将淀粉分解为可测量的还原糖,然后通过比色法或其他方法测定这些还原糖的含量,从而推算出原始样品中的淀粉含量。
所需仪器与材料
分析天平:精度达到0.0001g,用于精确称量样品。
恒温水浴锅:用于控制酶反应温度。
分光光度计:用于测量吸光度,进而计算还原糖浓度。
离心机:用于分离溶液中的固体杂质。
移液器:用于精确转移液体。
玻璃器皿:如锥形瓶、试管等。
材料
α-淀粉酶:用于初步水解淀粉。
葡萄糖淀粉酶:进一步水解生成葡萄糖。
3,5-二硝基水杨酸试剂(DNS):用于检测还原糖。
标准葡萄糖溶液:用于制作标准曲线。
待测粮油及制品样品:需要分析的具体样品。
操作步骤
样品准备
准确称取适量的样品(例如1-2克),记录其重量。
将样品置于锥形瓶中,加入适量蒸馏水(约50ml),搅拌均匀。
酶水解
加入适量α-淀粉酶,在95°C下加热10分钟进行预处理。
冷却至60°C后,加入葡萄糖淀粉酶,调整pH值至4.5左右,并在60°C下保温1小时,使淀粉完全水解为葡萄糖。
终止反应
反应结束后,迅速加热至100°C,保持5分钟以灭活酶。
还原糖测定
使用DNS法测定还原糖含量:
取一定体积的水解液(例如1ml),加入DNS试剂,在沸水中煮沸5分钟,冷却后用蒸馏水定容至适当体积。
使用分光光度计在540nm波长处测量吸光度。
根据标准葡萄糖溶液制作的标准曲线,计算水解液中的还原糖含量(mg/ml)。
结果计算
根据还原糖含量(mg/ml)和样品重量,推算出样品中的淀粉含量(%)。通常淀粉转化为葡萄糖的比例约为0.9(即每克淀粉相当于0.9克葡萄糖)。
二、酸水解法
酸水解法适用于不适用于酶水解法的复杂样品,它通过强酸将淀粉彻底水解为单糖,再通过还原糖测定方法进行定量。
所需仪器与材料
分析天平:精度达到0.0001g,用于精确称量样品。
恒温水浴锅:用于控制酸水解温度。
分光光度计:用于测量吸光度,进而计算还原糖浓度。
离心机:用于分离溶液中的固体杂质。
移液器:用于精确转移液体。
玻璃器皿:如锥形瓶、试管等。
材料
浓硫酸:用于水解淀粉。
3,5-二硝基水杨酸试剂(DNS):用于检测还原糖。
标准葡萄糖溶液:用于制作标准曲线。
待测粮油及制品样品:需要分析的具体样品。
操作步骤
样品准备
准确称取适量的样品(例如1-2克),记录其重量。
将样品置于锥形瓶中,加入适量浓硫酸(约50ml),摇匀。
酸水解
在电热板上缓慢加热至沸腾,维持微沸状态1小时,确保淀粉完全水解。
冷却后,用蒸馏水稀释并调节pH值至中性。
还原糖测定
使用DNS法测定还原糖含量:
取一定体积的水解液(例如1ml),加入DNS试剂,在沸水中煮沸5分钟,冷却后用蒸馏水定容至适当体积。
使用分光光度计在540nm波长处测量吸光度。
根据标准葡萄糖溶液制作的标准曲线,计算水解液中的还原糖含量(mg/ml)。
结果计算
根据还原糖含量(mg/ml)和样品重量,推算出样品中的淀粉含量(%)。同样地,淀粉转化为葡萄糖的比例约为0.9。
三、注意事项
安全防护:操作时应佩戴适当的个人防护装备,特别是在处理浓硫酸时要小心。
严格控制条件:无论是酶水解还是酸水解,时间和温度必须严格按照实验规程执行,以保证结果的准确性。
遵循标准:参考相关的国家标准或行业规范执行实验,如《GB/T 5009.9-2008 食品中淀粉的测定》等,确保实验方法和结果符合要求。
通过上述步骤,食品检验员能够有效地测定粮油及制品中的淀粉含量,从而全面了解产品的营养成分和品质特征。这些方法不仅为食品生产和质量控制提供了重要的技术支持,还帮助维护了市场的信誉。