工器具、

案板等接触面

（生产现场）

菌落

总数

≤5000个/25cm2

（生）

≤2500个/25cm2（熟）

梯度稀释，倾注接种营养琼脂培养基，36±1℃,48h后计数，报告

用浸有灭菌生理盐水的棉签在被检物体表面，取25cm2的面积，在其内涂抹10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检

1次/周/车间

一项不合格判为不合格品。不合格品按《不合格品控制程序》执行

大肠

菌群

≤30MPN/25cm2（生）

阴性（熟）

试管法：梯度稀释，三个稀释度接种LST肉汤培养基各三管，36±1℃,48h后记录产气管数，然后复发酵，记录产气管数，查MPN表报告

员工手

（生产现场）

菌落

总数

≤5000个/手（生）

≤2500个/手（熟）

梯度稀释，倾注接种营养琼脂培养基，36±1℃,48h后计数，报告

被检人五指并拢，用浸湿生理盐水的棉签在右手指曲面，从指尖到指端来回涂擦10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检

1次/周/车间

大肠

菌群

≤90MPN/手（生）

阴性（熟）

试管法：梯度稀释，三个稀释度接种LST肉汤培养基各三管，36±1℃,48h后记录产气管数，然后复发酵，记录产气管数，查MPN表报告

空

气

车间

菌落

总数

≤30个/皿

平板暴露法：车间在30m2以上者，于东、西、南、北（距墙1m处）、中五点；小于30m2者，于一条对角线里、中、外三点，高度均在1.5m处采样，打开平皿盖，使平板在空气中暴露30 min

取样后的琼脂培养基于37℃温箱培养48h后观察结果，求出5个或3个采样点的平均菌数

2次/月/车间

更衣室

菌落

总数

≤40个/皿

生产用水

菌落

总数

≤100CFU/ml

梯度稀释，倾注接种营养琼脂培养基，36±1℃,48h后计数，报告

对待取样的水龙头进行消毒，并打开水龙头数分钟，用经过灭菌的玻璃采样瓶去水样0.5L后及时送检，采样后按照每125ml水样加入0.1mg硫代硫酸钠除去残留余氯。

1次/月，全年检测完所有水龙头

大肠菌群

不得检出

多管发酵法：

1、乳糖发酵试验：接种5份10 mL水样双料培养基，每份接种10ml水样，将接种管置36℃ 士l℃ 培养箱内，培养24h士2h，如所有乳糖蛋白膝培养管都不产气产酸，则可报告为总大肠菌群阴性，如有产酸产气者，则按下列步骤进行。

2、分离培养：将产酸产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上，于36℃ 土1℃ 培养箱内培养18h—24h，观察菌落形态，挑取符合下列特征的菌落作革兰氏染色、镜检和证实试验。

3、证实试验：经上述染色镜检为革兰氏阴性无芽抱杆菌，同时接种乳糖蛋白胨培养液，置36℃ 士1℃培养箱中培养24h士2h，有产酸产气者，即证实有总大肠菌群存在。

4、结果报告：查MPN ( most Probable number，最可能数）检索表，报告每l00ml水样中的总大肠菌群最可能数（MPN）值。稀释样品查表后所得结果应乘稀释倍数。如所有乳糖发酵管均阴性时，可报告总大肠菌群未检出