食品和水质中大肠杆菌测试方法
一、食品大肠杆菌检验适用范围：适用于各类食品、饮用水、原料和纯净水等样品中大肠菌群的快速测定和快速计数。
二、快速检验方法的原理：将乳糖、显色剂和选择性培养基加载在纸片上，经培养后能够在纸片上生长并发酵乳糖产酸的即为大肠菌群阳性，记录每个稀释度大肠菌群阳性纸片数，根据大肠菌群MPN表查出相应的大肠菌群数。
三、快速检验操作方法：
方法（1）1样品处理：无菌称取样品25g(或25mL)放入含有225mL灭菌生理盐水的采样瓶或均质杯中，经充分振摇做成1：10的样品匀液，用1mL灭菌吸管吸取1：10样品匀液，注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内，振摇试管制成1：100的稀释液。以此类推，每个稀释度更换一支灭菌吸管。2接种：选取两个稀释度进行接种，普通食品一般采用1：10和1：100这两个稀释度，饮料和饮用水采用原液和1：10两个稀释度。每份由三片大纸片(接10mL),六片小纸片(接1mL)组成,大片每小袋二张叠放算作一片。用灭菌吸管吸取10 mL 1：10稀释液加到含有大纸片的塑料袋中(相当于接样品1g)，吸透后平放，做三个重复。再用1mL灭菌吸管吸取1 mL同一稀释液涂布到含有小纸片的塑料袋中(相当于接样品0.1g)，做三个重复。再取一支1 mL灭菌吸管吸取1 mL 1：100稀释液涂布到含有小纸片的塑料袋中(相当于接样品0.01g)，做三个重复。3 培养：将接种好的纸片(可叠放)放入37°C培养箱中培养15h～24h。
方法（2） 1取样接种：用灭菌吸管吸取10mL水样插入装有大纸片的塑料薄膜袋中，均匀涂布，共做5个重复;分别取1mL水样加到小纸片中，共接5个重复;另取1mL水样加到9mL无菌水中混匀，用1mL灭菌吸管分别吸取1mL(即0.1mL水样),加到最后5片小纸片中。2培养：将接种好的纸片平放于培养箱中，37℃培养15h。3结果判断：观察每片颜色变化，若纸片保持紫蓝色不变为大肠菌群阴性，纸片变黄或在黄色背景上呈现红色斑点或片状红晕为阳性。4报告结果：根据每个稀释度的阳性反应纸片数，查MPN表可得出水样中大肠杆菌的MPN值。
四、数据结果判断与计数分析：若纸片变黄或在黄色背景上呈现红色斑点为大肠菌群阳性纸片。纸片保持紫兰色不变或在紫兰色背景上呈现红色斑点，但周围没有黄色均为大肠菌群阴性纸片。记录每个稀释度大肠菌群阳性纸片数，根据大肠菌群MPN表查出相应的大肠菌群数。如接种的第一个稀释度的稀释液为原液，应将表上查出的结果除以10，以此类推。
五、检测方法特点：与国标法中的九管法相对应，将原来几步的试验简化为一步，时间由78h缩短为24h以内，省去了制备培养基、消毒和培养器皿的清洗处理等大量辅助性工作，随时可以打开包装进行抽样检测。注意事项：如果样品的酸碱度在pH7以下，应先用灭菌1mol/L氢氧化钠(NaOH)调节溶液调至中性，避免因pH的原因导致的纸片变黄而影响结果观察。
二、快速检验方法的原理：将乳糖、显色剂和选择性培养基加载在纸片上，经培养后能够在纸片上生长并发酵乳糖产酸的即为大肠菌群阳性，记录每个稀释度大肠菌群阳性纸片数，根据大肠菌群MPN表查出相应的大肠菌群数。
三、快速检验操作方法：
方法（1）1样品处理：无菌称取样品25g(或25mL)放入含有225mL灭菌生理盐水的采样瓶或均质杯中，经充分振摇做成1：10的样品匀液，用1mL灭菌吸管吸取1：10样品匀液，注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内，振摇试管制成1：100的稀释液。以此类推，每个稀释度更换一支灭菌吸管。2接种：选取两个稀释度进行接种，普通食品一般采用1：10和1：100这两个稀释度，饮料和饮用水采用原液和1：10两个稀释度。每份由三片大纸片(接10mL),六片小纸片(接1mL)组成,大片每小袋二张叠放算作一片。用灭菌吸管吸取10 mL 1：10稀释液加到含有大纸片的塑料袋中(相当于接样品1g)，吸透后平放，做三个重复。再用1mL灭菌吸管吸取1 mL同一稀释液涂布到含有小纸片的塑料袋中(相当于接样品0.1g)，做三个重复。再取一支1 mL灭菌吸管吸取1 mL 1：100稀释液涂布到含有小纸片的塑料袋中(相当于接样品0.01g)，做三个重复。3 培养：将接种好的纸片(可叠放)放入37°C培养箱中培养15h～24h。
方法（2） 1取样接种：用灭菌吸管吸取10mL水样插入装有大纸片的塑料薄膜袋中，均匀涂布，共做5个重复;分别取1mL水样加到小纸片中，共接5个重复;另取1mL水样加到9mL无菌水中混匀，用1mL灭菌吸管分别吸取1mL(即0.1mL水样),加到最后5片小纸片中。2培养：将接种好的纸片平放于培养箱中，37℃培养15h。3结果判断：观察每片颜色变化，若纸片保持紫蓝色不变为大肠菌群阴性，纸片变黄或在黄色背景上呈现红色斑点或片状红晕为阳性。4报告结果：根据每个稀释度的阳性反应纸片数，查MPN表可得出水样中大肠杆菌的MPN值。
四、数据结果判断与计数分析：若纸片变黄或在黄色背景上呈现红色斑点为大肠菌群阳性纸片。纸片保持紫兰色不变或在紫兰色背景上呈现红色斑点，但周围没有黄色均为大肠菌群阴性纸片。记录每个稀释度大肠菌群阳性纸片数，根据大肠菌群MPN表查出相应的大肠菌群数。如接种的第一个稀释度的稀释液为原液，应将表上查出的结果除以10，以此类推。
五、检测方法特点：与国标法中的九管法相对应，将原来几步的试验简化为一步，时间由78h缩短为24h以内，省去了制备培养基、消毒和培养器皿的清洗处理等大量辅助性工作，随时可以打开包装进行抽样检测。注意事项：如果样品的酸碱度在pH7以下，应先用灭菌1mol/L氢氧化钠(NaOH)调节溶液调至中性，避免因pH的原因导致的纸片变黄而影响结果观察。
