网站首页 > 技术知识 >

沙门氏菌、霉菌和酵母的检测方法

一、霉菌和酵母的检测方法
一、霉菌和酵母的检验适用范围:本品可用于各类食品及饮用水中霉菌和酵母菌的计数。

二、快速检验的方法原理:将霉菌营养培养基、吸水凝胶和酶显色剂加载在纸片上,通过培养,在酶显色剂的放大作用下,使霉菌和酵母菌在纸片上显现出出来,通过计数报告结果。与传统方法相比,省去了配制培养基、消毒和培养器皿的清洗处理等大量辅助性工作,即开即用,操作简便。培养时间由一周缩短为48h~72h。

三、快速检验的操作方法:1样品处理:无菌称取样品25g(或25mL)放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内,经充分振摇做成1:10的稀释液,用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌水的试管内,用1mL灭菌吸管反复吸吹50次做成1:100的稀释液,以此类推,每个稀释度更换一支灭菌吸管。2接种:1)一般食品选2~3个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如食用纯水和矿泉水等)可直接用原液检测。将检验纸片水平放台面上,揭开上面的透明薄膜,用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液1mL,均匀加到中央的滤纸片上,然后轻轻将上盖膜放下,静置5min,每个稀释度接种两片。2)用手指先沿方格区边缘刮一下,防止水外流,然后再在中间轻轻推刮,使水分在纸片方格区内均匀分布,并将气泡赶走。3培养:将加了样的检验纸片每12片叠放在一起,放入自封袋中,平放在28℃培养箱内培养48h开始观察计数。4结果判断与计数:霉菌和酵母菌在纸片上生长后会显示蓝色斑点,霉菌菌落显示的斑点略大或有点扩散,酵母菌落则较小而圆滑,许多霉菌在培养后期全呈现其本身特有的颜色。选择菌落数适中(10~50个)的纸片进行计数,乘以稀释倍数后即为每克(或毫升)样品中霉菌和酵母菌的数目。

二、沙门氏菌的检测方法
一、沙门氏菌快速检验适用范围:可用于各类食品和原料中沙门氏菌的定性和初筛检测。以及突发事件应急检测需要。

二、沙门氏菌快速检验 方法原理:将选择性培养基中加入专一性的辛酯酶显色剂,并将其加载在纸片上,通过培养,如果样品中含有沙门氏菌,即可在纸片上呈紫红色的菌落。

三、沙门氏菌检验操作方法:1样品处理:无菌称取待测样品25g(或25mL)放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内,经充分振摇或置均质器中做成1:10的样品匀液。2接种:将测试片置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置5 min使培养基凝固,最后用手轻轻地压 一下。每个样品接种两片。3培养:将测试片叠在一起放回原自封袋中,堆叠片数不超过12片,透明面朝上水平置于恒温培养箱内。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。4对测试片进行观察,呈紫红色的菌落为沙门氏菌;呈蓝色的菌落为其他大肠菌,葡萄球菌不生长。

四、检验方法注意事项:1有关验证试验表明,测试片具有较强的敏感性,在1.5×10-8稀释时仍可检出菌落。临床实际应用结果显示阳性检出率高于分离培养法1.84‰,复查准确率提高约13.0%。2 本法还可应用于从业人员体检、中毒样品和物体表面的检测,用取样棉签涂抹被测物体表面,放入装有3mL灭菌生理盐水的试管中,摇晃10s,然后取1mL接种到测试片上。3注意使用过的测试片上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理 。

农业部 人力资源与社会保障部 国家食品药品监督管理局 农业农村部农产品质量安全中心 中国计量测试协会