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实验室常用培养基配制方法

LB培养基
将下列组分溶解在0.9L水中:

蛋白胨

10g

酵母提取物

5g

氯化钠

10g

如果需要用1N NaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。

TB培养基
将下列组分溶解在0.9L水中:

蛋白胨

12g

酵母提取物

24g

甘油

4ml

各组分溶解后高压灭菌。冷却到60℃,再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/0.72 mol/L K2HPO4的溶液(2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中,使终体积为100ml。高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌)。

2×YT培养基
将下列组分溶解在0.9L水中:

蛋白胨

16g

酵母提取物

10g

氯化钠

4ml

如果需要用1N NaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。

SOB培养基
将下列组分溶解在0.9L水中:

蛋白胨

20g

酵母提取物

5g

氯化钠

0.5g

1 mol/L 氯化钾

2.5ml

用水补足体积到1L。分成100ml的小份,高压灭菌。培养基冷却到室温后,再在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。

SOC培养基
成分、方法同SOB培养基的配制,只是在培养基冷却到室温后,除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外,再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖(18g葡萄糖溶于足够水中,再用水补足到100ml,用0.22um的滤膜过滤除菌)。

YPD培养基
将下列组分溶解在0.9L水中:

蛋白胨

20g

酵母提取物

10g

葡萄糖

20g

用水补足体积为1L后,高压灭菌。建议在高压灭菌之前,对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加1.6g色氨酸,因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。为了配制平板,需要在高压灭菌前加入20g琼脂粉。



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