粮油农残测定分析步骤
11.1 提取
11.1.1 粮食：样品经脱壳、磨粉，过20目筛并混匀。称取粮食试样10.00g，置150mL具塞锥形瓶中，加10g无水硫酸钠，混匀，加40mL二氯甲烷，在振荡器振摇0.5h，浸泡过夜，用滤纸过滤，弃去2～3mL初滤液，量取20.0mL滤液，置于50mL烧杯中，加3滴一缩二乙二醇溶液，放热水浴上挥干，如不太干，用吸耳球吹干。
11.1.2 油及油料：
11.1.2.1 比较纯净的油：称取5.00g混匀的样品，用50mL丙酮分次溶解并洗入100mL分液漏斗中。
11.1.2.2 毛油：称取2.00～5.00g混匀的样品，用40mL石油醚分次溶解并洗入100mL分液漏斗中。
11.1.2.3 棉籽：样品经脱壳、磨碎、混匀。称取10.00g试料装入滤纸筒中，置于60mL脂肪提取器中，用40mL石油醚提取8h，将提取液移入100mL分液漏斗中。
11.1.3 蔬菜、水果：取可食部分洗净、晾干、切碎、混匀。称取25.00g试料加20g无水硫酸钠后，在乳钵中用力研碎，至植物组织全部研成泥状，再加10g无水硫酸钠继续研磨至干粉状，移至250mL具塞锥形瓶中，再用约5g无水硫酸钠将乳钵研洗干净，一并移入具塞锥形瓶中，用二氯甲烷将乳钵研洗二次，每次50mL，洗净粘在乳钵上的残物，洗液并入具塞锥形瓶中，在振荡器上振摇0.5h，浸泡过夜，用滤纸过滤，弃去2～3mL初滤液，吸取50.00mL滤液，置脂肪提取器的接收瓶内，加3滴一缩二乙二醇溶液，在水浴上蒸干溶剂至虹吸节内，弃去蒸出的二氯甲烷，直至蒸干，取下接收瓶，用吸耳球吹干残留溶剂。
11.2 净化
11.2.1 粮食：沿上述含提取物的烧杯壁，加入3mL丙酮，使残渣完全溶解后，加15mL凝固液，放置15min，并时时摇动。将垂熔漏斗下接抽滤器(或抽滤瓶)，先铺一张滤纸，再铺一薄层约1g的硅藻土作为助滤剂，用丙酮(10%)洗涤多次后备用;弃去洗涤液。将样品凝固液倾入准备好的垂熔漏斗中，放置10min以上，慢速抽滤于下面的抽滤管内，抽干后，用滴管滴加约2mL丙酮(10%)，洗净烧杯内壁，洗液倾入垂融漏斗中，浸泡1～2min后，再行抽干，如此重复2～3次。将滤液移至25mL容量瓶中，用少量丙酮(10%)洗涤抽滤管，洗液并入容量瓶中稀释至刻度，混匀。
11.2.2 油及油料：
11.2.2.1 比较纯净的油：在上述含有油样的丙酮溶液的分液漏斗中，加10mL水，轻轻摇匀，静置1h，弃去分出的油层，将丙酮提取液放入离心管中，以2500r/min离心0.5h，用滴管吸取上层澄清丙酮提取液，置于另一分液漏斗中，加30mL二氯甲烷，振摇提取1min，放置1h，二氯甲烷层经盛有约10g无水硫酸钠的漏斗滤入脂肪提取器的接收瓶中。在二氯甲烷溶液内加3滴一缩二乙二醇溶液，在水浴上将二氯甲烷蒸发至虹吸节内，弃去蒸出的二氯甲烷。分液漏斗内的水层用10mL二氯甲烷振摇洗涤一次，经原无水硫酸钠漏斗滤入接收瓶中，继续蒸发至干，取下接收瓶，用吸耳球吹干残留溶剂。沿瓶壁加入3mL丙酮溶解残渣，以下按11.2.1自“加15mL凝固液”起依法操作。
11.2.2.2 毛油：在上述含有油样的石油醚溶液的分液漏斗中，加10mL二甲基亚砜，振摇1min，放置分层后，将二甲基亚砜分入另一分液漏斗中，石油醚层再用10mL二甲基亚砜振摇一次，合并二次提取液，加10mL石油醚振摇洗涤二甲基亚砜提取液一次。将二甲基亚砜层移入盛有2g氯化钠和150mL水的分液漏斗中，弃去石油醚层。二甲基亚砜水溶液用二氯甲烷提取四次，每次25mL，合并二氯甲烷提取液，用7.5，5mL氢氧化钠溶液(20g/L)振摇提取二次，以洗去植物中的天然酚类物质，弃去洗涤液。二氯甲烷层再用氯化钠溶液(100g/L)洗涤二次，每次15mL，最后用15mL水洗涤一次。二氯甲烷层经无水硫酸钠脱水滤入脂肪提取器的接收瓶中，以下按11.2.2.1自“在二氯甲烷溶液内加3滴一缩二乙二醇溶液”起依法操作。
11.2.2.3 棉籽：按11.2.2.2毛油中的方法净化。
11.2.3 蔬菜、水果：沿上述含有提取物的接收瓶瓶壁加入3mL丙酮，并转动以溶解瓶中提取物，加入10mL凝固液，再转动接收瓶，使凝固液布满内壁，放置10min，并时时转动。以下按11.2.1自“将垂熔漏斗下接抽滤器(或抽滤瓶)，先铺一张滤纸，再铺一薄层约1g的硅藻土作为助滤剂”起依法操作。
12 测定
吸取5.0mL西维因标准使用液(相当50?g西维因)或1.0mL西维因标准使用液(相当1.0?g西维因，接近样品量)，置于50mL烧杯中，加3滴一缩二乙二醇溶液，在热水浴上挥干，加3mL丙酮溶解，并加15mL凝固液，混匀，移入25mL容量瓶中，用丙酮(10%)洗涤烧杯，洗液并入容量瓶中并稀释至刻度，作为比色时的标准对照溶液。
吸取上述定容后的试样溶液和标准溶液各5.0mL，分别置于具塞刻度试管中，各加2mL氢氧化钾-乙醇溶液(56g/L)，混匀，放置2min后再各加1mL显色剂，混匀。以水调整零点，用1cm比色杯，于波长475nm处测吸光度。
同时，另取两个试管，一管加入5mL定容后的标准溶液，另一管加入5mL定容后的样品溶液，用2mL乙醇代替氢氧化钾-乙醇溶液，按上述方法同样操作，于波长475nm处分别测吸光度，作为试剂空白和样品空白。
11.1.1 粮食：样品经脱壳、磨粉，过20目筛并混匀。称取粮食试样10.00g，置150mL具塞锥形瓶中，加10g无水硫酸钠，混匀，加40mL二氯甲烷，在振荡器振摇0.5h，浸泡过夜，用滤纸过滤，弃去2～3mL初滤液，量取20.0mL滤液，置于50mL烧杯中，加3滴一缩二乙二醇溶液，放热水浴上挥干，如不太干，用吸耳球吹干。
11.1.2 油及油料：
11.1.2.1 比较纯净的油：称取5.00g混匀的样品，用50mL丙酮分次溶解并洗入100mL分液漏斗中。
11.1.2.2 毛油：称取2.00～5.00g混匀的样品，用40mL石油醚分次溶解并洗入100mL分液漏斗中。
11.1.2.3 棉籽：样品经脱壳、磨碎、混匀。称取10.00g试料装入滤纸筒中，置于60mL脂肪提取器中，用40mL石油醚提取8h，将提取液移入100mL分液漏斗中。
11.1.3 蔬菜、水果：取可食部分洗净、晾干、切碎、混匀。称取25.00g试料加20g无水硫酸钠后，在乳钵中用力研碎，至植物组织全部研成泥状，再加10g无水硫酸钠继续研磨至干粉状，移至250mL具塞锥形瓶中，再用约5g无水硫酸钠将乳钵研洗干净，一并移入具塞锥形瓶中，用二氯甲烷将乳钵研洗二次，每次50mL，洗净粘在乳钵上的残物，洗液并入具塞锥形瓶中，在振荡器上振摇0.5h，浸泡过夜，用滤纸过滤，弃去2～3mL初滤液，吸取50.00mL滤液，置脂肪提取器的接收瓶内，加3滴一缩二乙二醇溶液，在水浴上蒸干溶剂至虹吸节内，弃去蒸出的二氯甲烷，直至蒸干，取下接收瓶，用吸耳球吹干残留溶剂。
11.2 净化
11.2.1 粮食：沿上述含提取物的烧杯壁，加入3mL丙酮，使残渣完全溶解后，加15mL凝固液，放置15min，并时时摇动。将垂熔漏斗下接抽滤器(或抽滤瓶)，先铺一张滤纸，再铺一薄层约1g的硅藻土作为助滤剂，用丙酮(10%)洗涤多次后备用;弃去洗涤液。将样品凝固液倾入准备好的垂熔漏斗中，放置10min以上，慢速抽滤于下面的抽滤管内，抽干后，用滴管滴加约2mL丙酮(10%)，洗净烧杯内壁，洗液倾入垂融漏斗中，浸泡1～2min后，再行抽干，如此重复2～3次。将滤液移至25mL容量瓶中，用少量丙酮(10%)洗涤抽滤管，洗液并入容量瓶中稀释至刻度，混匀。
11.2.2 油及油料：
11.2.2.1 比较纯净的油：在上述含有油样的丙酮溶液的分液漏斗中，加10mL水，轻轻摇匀，静置1h，弃去分出的油层，将丙酮提取液放入离心管中，以2500r/min离心0.5h，用滴管吸取上层澄清丙酮提取液，置于另一分液漏斗中，加30mL二氯甲烷，振摇提取1min，放置1h，二氯甲烷层经盛有约10g无水硫酸钠的漏斗滤入脂肪提取器的接收瓶中。在二氯甲烷溶液内加3滴一缩二乙二醇溶液，在水浴上将二氯甲烷蒸发至虹吸节内，弃去蒸出的二氯甲烷。分液漏斗内的水层用10mL二氯甲烷振摇洗涤一次，经原无水硫酸钠漏斗滤入接收瓶中，继续蒸发至干，取下接收瓶，用吸耳球吹干残留溶剂。沿瓶壁加入3mL丙酮溶解残渣，以下按11.2.1自“加15mL凝固液”起依法操作。
11.2.2.2 毛油：在上述含有油样的石油醚溶液的分液漏斗中，加10mL二甲基亚砜，振摇1min，放置分层后，将二甲基亚砜分入另一分液漏斗中，石油醚层再用10mL二甲基亚砜振摇一次，合并二次提取液，加10mL石油醚振摇洗涤二甲基亚砜提取液一次。将二甲基亚砜层移入盛有2g氯化钠和150mL水的分液漏斗中，弃去石油醚层。二甲基亚砜水溶液用二氯甲烷提取四次，每次25mL，合并二氯甲烷提取液，用7.5，5mL氢氧化钠溶液(20g/L)振摇提取二次，以洗去植物中的天然酚类物质，弃去洗涤液。二氯甲烷层再用氯化钠溶液(100g/L)洗涤二次，每次15mL，最后用15mL水洗涤一次。二氯甲烷层经无水硫酸钠脱水滤入脂肪提取器的接收瓶中，以下按11.2.2.1自“在二氯甲烷溶液内加3滴一缩二乙二醇溶液”起依法操作。
11.2.2.3 棉籽：按11.2.2.2毛油中的方法净化。
11.2.3 蔬菜、水果：沿上述含有提取物的接收瓶瓶壁加入3mL丙酮，并转动以溶解瓶中提取物，加入10mL凝固液，再转动接收瓶，使凝固液布满内壁，放置10min，并时时转动。以下按11.2.1自“将垂熔漏斗下接抽滤器(或抽滤瓶)，先铺一张滤纸，再铺一薄层约1g的硅藻土作为助滤剂”起依法操作。
12 测定
吸取5.0mL西维因标准使用液(相当50?g西维因)或1.0mL西维因标准使用液(相当1.0?g西维因，接近样品量)，置于50mL烧杯中，加3滴一缩二乙二醇溶液，在热水浴上挥干，加3mL丙酮溶解，并加15mL凝固液，混匀，移入25mL容量瓶中，用丙酮(10%)洗涤烧杯，洗液并入容量瓶中并稀释至刻度，作为比色时的标准对照溶液。
吸取上述定容后的试样溶液和标准溶液各5.0mL，分别置于具塞刻度试管中，各加2mL氢氧化钾-乙醇溶液(56g/L)，混匀，放置2min后再各加1mL显色剂，混匀。以水调整零点，用1cm比色杯，于波长475nm处测吸光度。
同时，另取两个试管，一管加入5mL定容后的标准溶液，另一管加入5mL定容后的样品溶液，用2mL乙醇代替氢氧化钾-乙醇溶液，按上述方法同样操作，于波长475nm处分别测吸光度，作为试剂空白和样品空白。
