1、检验原理

霉菌和酵母菌数测定（Determination of molds and yeast count）是指化妆品检样在一定条件下培养后，1g或1ml化妆品中所污染的活的霉菌和酵母菌数量，籍以判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般卫生状况。

本方法根据霉菌和酵母菌特有的形态和培养特性，在虎红培养基上，置28℃±2℃培养72h，计算所生长的霉菌和酵母菌数。

2、 仪器和设备

培养箱：28℃±2℃；振荡器；天平；三角瓶：250ml；试管：15×150mm；平皿:直径9cm；吸管：1ml、10ml；量筒：200ml；酒精灯； 高压灭菌器

3、 培养基和试剂℃

1）生理盐水

与细菌总数测定用的生理盐水一致。

2）虎红﹙孟加拉红﹚培养基

表37  虎红培养基

制法：将上述各成分﹙除虎红外﹚加入蒸馏水中溶解后，再加入虎红溶液分装后，103.43kpa﹙121^℃151b﹚20min高压灭菌，另用少量乙醇溶解氯霉素，过滤溶解后加入培养基中，若无氯霉素，使用时每1000ml加链霉素30mg

4、操作步骤

1）样品稀释

与细菌菌落总数测定稀释方法一致。

2）培养

取1：10、1：100、1：1000的检液各1ml分别注入灭菌平皿内，每个稀释各用2个平皿，注入融化并冷至45℃±1℃左右的虎红培养基，充分摇匀。凝固后，翻转平板，置28℃±1℃培养72h±2h，计数平板内生长的霉菌和酵母菌数。若有霉菌蔓延生长，为避免影响其它霉菌和酵母菌的计数时，于48h±2h应及时将此平板取出计数。

3）计算方法

先点数每个平板上生长的霉菌和酵母菌菌落数，求出每个稀释度的平均菌落。判定结果时，应选取菌落数在5个～50个范围之内的平皿计数，乘以稀释倍数后，即为每g﹙或每ml﹚检样中所含的霉菌和酵母菌数。其它范围内的菌落数报告应参照菌落总数的报告方法报告之。

5．检验结果

每g﹙或每ml﹚化妆品含霉菌和酵母菌数以CFU/g﹙ml﹚表示。