食品中铅含量的检测方法
1 二硫腙比色法
2 原理 ：
试样经消化后，在 pH 8.5～9.0 时，铅离子与二硫腙生成红色络合物，溶于三氯甲烷。加入柠檬酸铵、氰化钾和盐酸羟胺等，防止铁、铜、锌等离子干扰，与标准系列比较定量。
3 试剂和材料
3.1 氨水（1+1）。
3.2 盐酸（1＋1）：量取 100 mL 盐酸，加入 100 mL 水中。
3.3 酚红指示液（1 g/L）：称取 0.10 g酚红， 用少量多次乙醇溶解后移入 100 mL 容量瓶中并定容至刻度。
3.4 盐酸羟胺溶液（200 g/L）：称取 20.0 g 盐酸羟胺，加水溶解至 50 mL，加 2 滴酚红指示液，加氨水（1+1)，调 pH至 8.5～9.0（由黄变红，再多加 2 滴），用二硫腙-三氯甲烷溶液提取至三氯甲烷层绿色不变为止，再用三氯甲烷洗二次，弃去三氯甲烷层，水层加盐酸（1＋1）至呈酸性，加水至100 mL。
3.5 柠檬酸铵溶液（200 g/L）：称取 50 g 柠檬酸铵，溶于 100 mL 水中，加 2滴酚红指示液，加氨水，调 pH至 8.5～9.0，用二硫腙-三氯甲烷溶液提取数次，每次 10 mL～20 mL，至三氯甲烷层绿色不变为止，弃去三氯甲烷层，再用三氯甲烷洗二次，每次 5 mL，弃去三氯甲烷层，加水稀释至 250 mL。
3.6 氰化钾溶液（100 g/L）：称取 10.0 g 氰化钾，用水溶解后稀释至 100 mL。
3.7 三氯甲烷：不应含氧化物。
3.7.1 检查方法：量取 10 mL三氯甲烷，加 25 mL 新煮沸过的水，振摇 3 min，静置分层后，取 10 mL水溶液，加数滴碘化钾溶液（150 g/L）及淀粉指示液，振摇后应不显蓝色。
3.7.2 处理方法：于三氯甲烷中加入 1/10～1/20 体积的硫代硫酸钠溶液（200 g/L）洗涤，再用水洗后加入少量无水氯化钙脱水后进行蒸馏，弃去最初及最后的十分之一馏出液，收集中间馏出液备用。
3.8 淀粉指示液：称取 0.5 g 可溶性淀粉，加 5 mL 水搅匀后，慢慢倒入 100 mL 沸水中，边倒边搅拌，煮沸，放冷备用，临用时配制。
3.9 硝酸（1＋99）：量取 1 mL 硝酸，加入 99 mL 水中。
3.10 二硫腙-三氯甲烷溶液（0.5 g/L）：保存冰箱中，必要时用下述方法纯化。
称取 0.5 g 研细的二硫腙, 溶于 50 mL三氯甲烷中， 如不全溶， 可用滤纸过滤于 250 mL 分液漏斗中，用氨水（1＋99）提取三次，每次 100 mL，将提取液用棉花过滤至 500 mL 分液漏斗中，用盐酸（1＋1）调至酸性，将沉淀出的二硫腙用三氯甲烷提取 2 次～3 次，每次 20 mL，合并三氯甲烷层，用等量水洗涤两次，弃去洗涤液，在 50 ℃水浴上蒸去三氯甲烷。精制的二硫腙置硫酸干燥器中，干燥备用。或将沉淀出的二硫腙用 200 mL，200 mL，100 mL 三氯甲烷提取三次，合并三氯甲烷层为二硫腙溶液。
3.11 二硫腙使用液：吸取 1.0 mL 二硫腙溶液，加三氯甲烷至 10 mL，混匀。用 1 cm比色杯，以三氯甲烷调节零点，于波长 510 nm处测吸光度（A），用式（4）算出配制 100 mL 二硫腙使用液（70％透光率）所需二硫腙溶液的毫升数（V）。
3.12 硝酸-硫酸混合液（4＋1）。
313 铅标准溶液（1.0 mg/mL）：准确称取 0.1598 g硝酸铅，加 10 mL 硝酸（1＋99），全部溶解后，移入 100 mL 容量瓶中，加水稀释至刻度。
3.14 铅标准使用液（10.0 μg/mL）：吸取 1.0 mL 铅标准溶液，置于 100 mL 容量瓶中，加水稀释至刻度。
4 仪器和设备
4.1 分光光度计。
4.2 天平：感量为 1 mg。
5 分析步骤
5.1 试样预处理
5.1.1 在采样和制备过程中，应注意不使试样污染。
5.1.2 粮食、豆类去杂物后，磨碎，过 20目筛，储于塑料瓶中，保存备用。
5.1.3 蔬菜、水果、鱼类、肉类及蛋类等水分含量高的鲜样，用食品加工机或匀浆机打成匀浆，储于塑料瓶中，保存备用。
5.2 试样消化
5.2.1 硝酸-硫酸法
5.2.2 粮食、粉丝、粉条、豆干制品、糕点、茶叶等及其他含水分少的固体食品：称取 5 g 或 10 g的粉碎样品（精确到 0.01 g），置于250 mL～500 mL 定氮瓶中，先加水少许使湿润，加数粒玻璃珠、10 mL～15 mL 硝酸，放置片刻，小火缓缓加热，待作用缓和，放冷。沿瓶壁加入 5 mL 或 10 mL 硫酸，再加热，至瓶中液体开始变成棕色时，不断沿瓶壁滴加硝酸至有机质分解完全。加大火力，至产生白烟，待瓶口白烟冒净后，瓶内液体再产生白烟为消化完全，该溶液应澄清无色或微带黄色，放冷（在操作过程中应注意防止爆沸或爆炸）。加 20 mL 水煮沸，除去残余的硝酸至产生白烟为止，如此处理两次，放冷。将冷后的溶液移入 50 mL 或 100 mL 容量瓶中，用水洗涤定氮瓶，洗液并入容量瓶中，放冷，加水至刻度，混匀。定容后的溶液每 10 mL 相当于 1 g 样品，相当加入硫酸量 1 mL。取与消化试样相同量的硝酸和硫酸，按同一方法做试剂空白试验。
5.2.3 蔬菜、水果：称取 25.00 g 或50.00 g洗净打成匀浆的试样（精确到 0.01 g），置于 250 mL～500 mL 定氮瓶中， 加数粒玻璃珠、 10 mL～15 mL 硝酸， 以下按 5.2.2 自“放置片刻……”起依法操作，但定容后的溶液每 10 mL 相当于 5 g样品，相当加入硫酸 1 mL。
5.2.4 酱、酱油、醋、冷饮、豆腐、腐乳、酱腌菜等：称取 10 g或 20 g 试样（精确到 0.01 g）或吸取 10.0 mL 或 20.0 mL 液体样品，置于 250 mL～500 mL 定氮瓶中，加数粒玻璃珠、5 mL～15 mL 硝酸。以下按 5.2.2 自“放置片刻……”起依法操作，但定容后的溶液每 10 mL相当于 2 g或 2 mL 试样。
5.2.5 含酒精性饮料或含二氧化碳饮料: 吸取 10.00 mL 或 20.00 mL 试样, 置于 250 mL～500 mL 定氮瓶中. 加数粒玻璃珠, 先用小火加热除去乙醇或二氧化碳, 再加 5 mL～10 mL 硝酸, 混匀后, 以下按 5.2.2 自“放置片刻……”起依法操作, 但定容后的溶液每 10 mL 相当于 2 mL 试样。
5.2.6 含糖量高的食品：称取 5 g 或 10 g 试样（精确至 0.01 g），置于 250 mL～500 mL 定氮瓶中，先加少许水使湿润，加数粒玻璃珠、5 mL～10 mL 硝酸，摇匀。缓缓加入5 mL 或 10 mL 硫酸，待作用缓和停止起泡沫后，先用小火缓缓加热（糖分易炭化），不断沿瓶壁补加硝酸，待泡沫全部消失后5.2.2 自“加20 mL 水煮沸……”起依法操作。
5.2.7 水产品：取可食部分样品捣成匀浆，称取 5 g或 10 g 试样（精确至 0.01 g，海产藻类、贝类可适当减少取样量），置于 250 mL～500 mL 定氮瓶中，加数粒玻璃珠，5 mL～10 mL 硝酸，混匀后，以下按 5.2.2自“沿瓶壁加入 5 mL 或 10 mL硫酸……”起依法操作。 5.2.8 灰化法
5.2.8.1 粮食及其他含水分少的食品：称取 5 g 试样（精确至 0.01 g），置于石英或瓷坩锅中，加热至炭化，然后移入马弗炉中, 500 ℃灰化 3 h, 放冷，取出坩锅，加硝酸（1＋1），润湿灰分，用小火蒸干，在 500 ℃烧 1 h, 放冷。取出坩锅。加 1 mL 硝酸（1＋l），加热，使灰分溶解，移入50 mL 容量瓶中，用水洗涤坩锅，洗液并入容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。
5.2.8.2 含水分多的食品或液体试样：称取 5.0 g 或吸取5.00 mL 试样，置于蒸发皿中，先在水浴上蒸干，再按 5.2.8.1 自“加热至炭化……”起依法操作。
5.3 测定
25.3.1 吸取 10.0 mL 消化后的定容溶液和同量的试剂空白液，分别过于 125 mL 分液漏斗中，各加水至 20 mL。
5.3.2 吸取 0 mL，0.10 mL，0.20 mL，0.30 mL，0.40 mL，0.50 mL 铅标准使用液（相当 0.0 μg，1.0 μg，2.0 μg，3.0 μg，4.0 μg，5.0 μg 铅），分别置于 125 mL 分液漏斗中，各加硝酸（1+99）至 20 mL。于试样消化液、试剂空白液和铅标准液中各加 2.0 mL 柠檬酸铵溶液（200 g/L），l.0 mL 盐酸羟胺溶液（200 g/L）和 2 滴酚红指示液，用氨水（1＋1）调至红色，再各加 2.0 mL 氰化钾溶液（100 g/L），混匀。各加 5.0 mL 二硫腙使用液，剧烈振摇 1 min，静置分层后，三氯甲烷层经脱脂棉滤入 1 cm比色杯中，以三氯甲烷调节零点于波长 510 nm处测吸光度，各点减去零管吸收值后，绘制标准曲线或计算一元回归方程，试样与曲线比较。
6 分析结果的表述
试样中铅含量按式（5）进行计算。
2 原理 ：
试样经消化后，在 pH 8.5～9.0 时，铅离子与二硫腙生成红色络合物，溶于三氯甲烷。加入柠檬酸铵、氰化钾和盐酸羟胺等，防止铁、铜、锌等离子干扰，与标准系列比较定量。
3 试剂和材料
3.1 氨水（1+1）。
3.2 盐酸（1＋1）：量取 100 mL 盐酸，加入 100 mL 水中。
3.3 酚红指示液（1 g/L）：称取 0.10 g酚红， 用少量多次乙醇溶解后移入 100 mL 容量瓶中并定容至刻度。
3.4 盐酸羟胺溶液（200 g/L）：称取 20.0 g 盐酸羟胺，加水溶解至 50 mL，加 2 滴酚红指示液，加氨水（1+1)，调 pH至 8.5～9.0（由黄变红，再多加 2 滴），用二硫腙-三氯甲烷溶液提取至三氯甲烷层绿色不变为止，再用三氯甲烷洗二次，弃去三氯甲烷层，水层加盐酸（1＋1）至呈酸性，加水至100 mL。
3.5 柠檬酸铵溶液（200 g/L）：称取 50 g 柠檬酸铵，溶于 100 mL 水中，加 2滴酚红指示液，加氨水，调 pH至 8.5～9.0，用二硫腙-三氯甲烷溶液提取数次，每次 10 mL～20 mL，至三氯甲烷层绿色不变为止，弃去三氯甲烷层，再用三氯甲烷洗二次，每次 5 mL，弃去三氯甲烷层，加水稀释至 250 mL。
3.6 氰化钾溶液（100 g/L）：称取 10.0 g 氰化钾，用水溶解后稀释至 100 mL。
3.7 三氯甲烷：不应含氧化物。
3.7.1 检查方法：量取 10 mL三氯甲烷，加 25 mL 新煮沸过的水，振摇 3 min，静置分层后，取 10 mL水溶液，加数滴碘化钾溶液（150 g/L）及淀粉指示液，振摇后应不显蓝色。
3.7.2 处理方法：于三氯甲烷中加入 1/10～1/20 体积的硫代硫酸钠溶液（200 g/L）洗涤，再用水洗后加入少量无水氯化钙脱水后进行蒸馏，弃去最初及最后的十分之一馏出液，收集中间馏出液备用。
3.8 淀粉指示液：称取 0.5 g 可溶性淀粉，加 5 mL 水搅匀后，慢慢倒入 100 mL 沸水中，边倒边搅拌，煮沸，放冷备用，临用时配制。
3.9 硝酸（1＋99）：量取 1 mL 硝酸，加入 99 mL 水中。
3.10 二硫腙-三氯甲烷溶液（0.5 g/L）：保存冰箱中，必要时用下述方法纯化。
称取 0.5 g 研细的二硫腙, 溶于 50 mL三氯甲烷中， 如不全溶， 可用滤纸过滤于 250 mL 分液漏斗中，用氨水（1＋99）提取三次，每次 100 mL，将提取液用棉花过滤至 500 mL 分液漏斗中，用盐酸（1＋1）调至酸性，将沉淀出的二硫腙用三氯甲烷提取 2 次～3 次，每次 20 mL，合并三氯甲烷层，用等量水洗涤两次，弃去洗涤液，在 50 ℃水浴上蒸去三氯甲烷。精制的二硫腙置硫酸干燥器中，干燥备用。或将沉淀出的二硫腙用 200 mL，200 mL，100 mL 三氯甲烷提取三次，合并三氯甲烷层为二硫腙溶液。
3.11 二硫腙使用液：吸取 1.0 mL 二硫腙溶液，加三氯甲烷至 10 mL，混匀。用 1 cm比色杯，以三氯甲烷调节零点，于波长 510 nm处测吸光度（A），用式（4）算出配制 100 mL 二硫腙使用液（70％透光率）所需二硫腙溶液的毫升数（V）。
3.12 硝酸-硫酸混合液（4＋1）。
313 铅标准溶液（1.0 mg/mL）：准确称取 0.1598 g硝酸铅，加 10 mL 硝酸（1＋99），全部溶解后，移入 100 mL 容量瓶中，加水稀释至刻度。
3.14 铅标准使用液（10.0 μg/mL）：吸取 1.0 mL 铅标准溶液，置于 100 mL 容量瓶中，加水稀释至刻度。
4 仪器和设备
4.1 分光光度计。
4.2 天平：感量为 1 mg。
5 分析步骤
5.1 试样预处理
5.1.1 在采样和制备过程中，应注意不使试样污染。
5.1.2 粮食、豆类去杂物后，磨碎，过 20目筛，储于塑料瓶中，保存备用。
5.1.3 蔬菜、水果、鱼类、肉类及蛋类等水分含量高的鲜样，用食品加工机或匀浆机打成匀浆，储于塑料瓶中，保存备用。
5.2 试样消化
5.2.1 硝酸-硫酸法
5.2.2 粮食、粉丝、粉条、豆干制品、糕点、茶叶等及其他含水分少的固体食品：称取 5 g 或 10 g的粉碎样品（精确到 0.01 g），置于250 mL～500 mL 定氮瓶中，先加水少许使湿润，加数粒玻璃珠、10 mL～15 mL 硝酸，放置片刻，小火缓缓加热，待作用缓和，放冷。沿瓶壁加入 5 mL 或 10 mL 硫酸，再加热，至瓶中液体开始变成棕色时，不断沿瓶壁滴加硝酸至有机质分解完全。加大火力，至产生白烟，待瓶口白烟冒净后，瓶内液体再产生白烟为消化完全，该溶液应澄清无色或微带黄色，放冷（在操作过程中应注意防止爆沸或爆炸）。加 20 mL 水煮沸，除去残余的硝酸至产生白烟为止，如此处理两次，放冷。将冷后的溶液移入 50 mL 或 100 mL 容量瓶中，用水洗涤定氮瓶，洗液并入容量瓶中，放冷，加水至刻度，混匀。定容后的溶液每 10 mL 相当于 1 g 样品，相当加入硫酸量 1 mL。取与消化试样相同量的硝酸和硫酸，按同一方法做试剂空白试验。
5.2.3 蔬菜、水果：称取 25.00 g 或50.00 g洗净打成匀浆的试样（精确到 0.01 g），置于 250 mL～500 mL 定氮瓶中， 加数粒玻璃珠、 10 mL～15 mL 硝酸， 以下按 5.2.2 自“放置片刻……”起依法操作，但定容后的溶液每 10 mL 相当于 5 g样品，相当加入硫酸 1 mL。
5.2.4 酱、酱油、醋、冷饮、豆腐、腐乳、酱腌菜等：称取 10 g或 20 g 试样（精确到 0.01 g）或吸取 10.0 mL 或 20.0 mL 液体样品，置于 250 mL～500 mL 定氮瓶中，加数粒玻璃珠、5 mL～15 mL 硝酸。以下按 5.2.2 自“放置片刻……”起依法操作，但定容后的溶液每 10 mL相当于 2 g或 2 mL 试样。
5.2.5 含酒精性饮料或含二氧化碳饮料: 吸取 10.00 mL 或 20.00 mL 试样, 置于 250 mL～500 mL 定氮瓶中. 加数粒玻璃珠, 先用小火加热除去乙醇或二氧化碳, 再加 5 mL～10 mL 硝酸, 混匀后, 以下按 5.2.2 自“放置片刻……”起依法操作, 但定容后的溶液每 10 mL 相当于 2 mL 试样。
5.2.6 含糖量高的食品：称取 5 g 或 10 g 试样（精确至 0.01 g），置于 250 mL～500 mL 定氮瓶中，先加少许水使湿润，加数粒玻璃珠、5 mL～10 mL 硝酸，摇匀。缓缓加入5 mL 或 10 mL 硫酸，待作用缓和停止起泡沫后，先用小火缓缓加热（糖分易炭化），不断沿瓶壁补加硝酸，待泡沫全部消失后5.2.2 自“加20 mL 水煮沸……”起依法操作。
5.2.7 水产品：取可食部分样品捣成匀浆，称取 5 g或 10 g 试样（精确至 0.01 g，海产藻类、贝类可适当减少取样量），置于 250 mL～500 mL 定氮瓶中，加数粒玻璃珠，5 mL～10 mL 硝酸，混匀后，以下按 5.2.2自“沿瓶壁加入 5 mL 或 10 mL硫酸……”起依法操作。 5.2.8 灰化法
5.2.8.1 粮食及其他含水分少的食品：称取 5 g 试样（精确至 0.01 g），置于石英或瓷坩锅中，加热至炭化，然后移入马弗炉中, 500 ℃灰化 3 h, 放冷，取出坩锅，加硝酸（1＋1），润湿灰分，用小火蒸干，在 500 ℃烧 1 h, 放冷。取出坩锅。加 1 mL 硝酸（1＋l），加热，使灰分溶解，移入50 mL 容量瓶中，用水洗涤坩锅，洗液并入容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。
5.2.8.2 含水分多的食品或液体试样：称取 5.0 g 或吸取5.00 mL 试样，置于蒸发皿中，先在水浴上蒸干，再按 5.2.8.1 自“加热至炭化……”起依法操作。
5.3 测定
25.3.1 吸取 10.0 mL 消化后的定容溶液和同量的试剂空白液，分别过于 125 mL 分液漏斗中，各加水至 20 mL。
5.3.2 吸取 0 mL，0.10 mL，0.20 mL，0.30 mL，0.40 mL，0.50 mL 铅标准使用液（相当 0.0 μg，1.0 μg，2.0 μg，3.0 μg，4.0 μg，5.0 μg 铅），分别置于 125 mL 分液漏斗中，各加硝酸（1+99）至 20 mL。于试样消化液、试剂空白液和铅标准液中各加 2.0 mL 柠檬酸铵溶液（200 g/L），l.0 mL 盐酸羟胺溶液（200 g/L）和 2 滴酚红指示液，用氨水（1＋1）调至红色，再各加 2.0 mL 氰化钾溶液（100 g/L），混匀。各加 5.0 mL 二硫腙使用液，剧烈振摇 1 min，静置分层后，三氯甲烷层经脱脂棉滤入 1 cm比色杯中，以三氯甲烷调节零点于波长 510 nm处测吸光度，各点减去零管吸收值后，绘制标准曲线或计算一元回归方程，试样与曲线比较。
6 分析结果的表述
试样中铅含量按式（5）进行计算。
