生活饮用水中挥发酚的测定
检验依据：GB/T5750.4-2006
1．仪器参数：
仪器：UV-1800紫外分光光度计
仪器条件：波长：510nm（玻璃比色皿10mm）
2．操作过程：试样按标准GB/T5750.4-2006步骤进行处理。
3．试剂配制：依据GB/T5750.4-2006试剂要求的方法配制。
4．校准曲线：
在8个250mL分液漏斗中，预先加入100 mL纯水，再分别加入0.00mL， 0.50mL，1.00mL，2.00mL，4.00mL，6.00mL，8.00mL，10.00mL挥发酚标准工作液，加水至250 mL。像各分液漏斗中加入2mL氨水-氯化铵缓冲溶液（4.46.1.3.4），再各加入1.5mL4-氨基安替比林（4.46.1.3.5），最后加入1.5mL铁氰化钾溶液（4.46.1.3.6）充分混匀，准确静置10min，加入10mL三氯甲烷振摇2min静置分层。在分液漏斗颈部塞入滤纸卷将三氯甲烷萃取溶液放入干燥闭塞管中，在560nm波长，以水作参比，测量吸光度。
以空白校正后的吸光度为纵坐标，以其对应的挥发酚含量（ug）为横坐标，绘制标准曲线。标准溶液系列及标准曲线见表1和图1。
表1挥发酚标准系列
|
编号 |
挥发酚含量 µg |
吸光值A |
|||
|
1 |
2 |
3 |
平均值 |
||
|
1# |
0 |
0.000 |
0.000 |
0.000 |
0 |
|
2# |
0.5 |
0.021 |
0.020 |
0.022 |
0.021 |
|
3# |
1 |
0.048 |
0.046 |
0.047 |
0.047 |
|
4# |
2 |
0.090 |
0.089 |
0.091 |
0.09 |
|
5# |
4 |
0.174 |
0.173 |
0.172 |
0.173 |
|
6 |
6 |
0.252 |
0.252 |
0.252 |
0.252 |
|
7 |
8 |
0.339 |
0.337 |
0.338 |
0.338 |
|
8# |
10 |
0.416 |
0.416 |
0.416 |
0.416 |
图1标准曲线
5.方法检出限
取250mL纯水于分液漏斗中，像分液漏斗中加入2mL氨水-氯化铵缓冲溶液（4.46.1.3.4），再各加入1.5mL4-氨基安替比林（4.46.1.3.5），最后加入1.5mL铁氰化钾溶液（4.46.1.3.6）充分混匀，准确静置10min，加入10mL三氯甲烷振摇2min静置分层。在分液漏斗颈部塞入滤纸卷将三氯甲烷萃取溶液放入干燥闭塞管中，以水作参比，测定20次试剂空白的吸光度。计算出20次试剂空白吸光度的标准偏差，按IUPAC规定DL=KS/b求出方法检出限，其中b为标准曲线的斜率，K=3。计算结果如表2所示。
表2 方法检出限
|
顺序号 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
|
吸光度 |
0.0089 |
0.0088 |
0.0089 |
0.0089 |
0.0088 |
0.0087 |
0.0088 |
0.0087 |
0.0089 |
0.0089 |
|
顺序号 |
11 |
12 |
13 |
14 |
15 |
16 |
17 |
18 |
19 |
20 |
|
吸光度 |
0.0088 |
0.0089 |
0.0088 |
0.0089 |
0.0088 |
0.0089 |
0.0088 |
0.0087 |
0.0088 |
0.0089 |
|
标准偏差S |
0.000048 | |||||||||
|
检出限 (mg /L) |
0.002 | |||||||||
|
公式 |
DL=KS/b（ K=3, S:空白的标准偏差，b:曲线斜率。） | |||||||||
|
备注 |
———— | |||||||||
6.精密度
方法验证中，对高、中、低3个浓度样品分别做6次平行实验，分别计算出RSD值，结果见表3所示。
表3 方法精密度
|
顺序号 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
检测平均值（mg/L） |
相对标准偏差RSD(℅) |
|
|
1# |
含量 (mg /L) |
0.008 |
0.009 |
0.009 |
0.008 |
0.01 |
0.009 |
0.009 |
8.52 |
|
2# |
0.018 |
0.017 |
0.016 |
0.017 |
0.015 |
0.016 |
0.016 |
6.36 |
|
|
3# |
0.038 |
0.04 |
0.039 |
0.041 |
0.04 |
0.043 |
0.040 |
4.29 |
|
由实验数据表明，本方法测定的RSD%均小于8.52%，符合精密度测试要求。
7.空白及样品测定
依据GB/T5750.4-2006测定空白及样品中挥发酚的含量，结果见表4。
表4 空白及样品的测定值
|
样品 |
取样量（mL） |
定容体积 （mL） |
测定值 （ug） |
含量 （mg/L） |
AVE (mg/L) |
|
Blank—1 |
50.00 |
50.00 |
—- |
—- |
—- |
|
Blank—2 |
50.00 |
50.00 |
—- | —- | |
|
Sample—1 |
50.00 |
50.00 |
—- |
—- |
—- |
|
Sample—2 |
50.00 |
50.00 |
—- |
—- |
8. 准确度（加标回收）
分别向试样中加入挥发酚标准工作液（ρ=1ug/mL ）0.50mL，2.50mL，8.00mL，使其加标量为0.5µg，2.5µg，8.0µg，每个加标量分别制备6份样品，按照实验步骤进行处理，分别计算回收率，结果见下表所示。
表5 回收率
| 样品中挥发酚的含量（mg/L） | 取样量（mL） | 试样中挥发酚的含量B（ug） | 添加量A（ug） | 测定值C（ug） | 回收率（%） | 平均回收率（%） |
|
—- |
25.00 |
—- |
0.50 |
0.486 |
96.7 |
96.6
|
|
25.00 |
—- |
0.489 |
97.3 |
|||
|
25.00 |
—- |
0.486 |
96.7 |
|||
|
25.00 |
—- |
0.487 |
96.9 |
|||
|
25.00 |
—- |
0.485 |
96.5 |
|||
|
25.00 |
—- |
0.481 |
95.7 |
|||
|
25.00 |
—- |
5.0 |
4.95 |
99.0 |
98.3
|
|
|
25.00 |
—- |
4.926 |
98.5 |
|||
|
25.00 |
—- |
4.896 |
97.9 |
|||
|
25.00 |
—- |
4.92 |
98.4 |
|||
|
25.00 |
—- |
4.876 |
97.5 |
|||
|
25.00 |
—- |
4.912 |
98.2 |
|||
|
25.00 |
—- |
8.0 |
8.02 |
100.3 |
98.1 |
|
|
25.00 |
—- |
7.56 |
94.5 |
|||
|
25.00 |
—- |
7.89 |
98.6 |
|||
|
25.00 |
—- |
8.12 |
101.5 |
|||
|
25.00 |
—- |
7.69 |
96.1 |
|||
|
25.00 |
—- |
7.8 |
97.5 |
由实验数据表明，本方法测定的回收率在96.6%~98.3 %之间，说明本实验准确度良好。
9.是否对方法偏离？
否。
10结论：
对水质挥发酚的测定符合GB/T5750.4-2006的要求。
